
Absidia coeruleaに由来するAcCDA1を用いたオリゴマーおよびポリマーキチンの酵素的脱アセチル化
要旨:
"キチンは高付加価値応用に向けた著しい可能性を有する構造生体高分子であり、キチン脱アセチル化酵素(CDA)がキチンをキトサンおよび部分アセチル化キトオリゴ糖(COS)に変換する可能性を有している。
筆者らはAbsidia coeruleaという糸状菌から分離したキチン脱アセチル化酵素であるAcCDA1の発現と特性化について報告しており、AcCDA1がコロイド状キチン、部分脱アセチル化キチン、異なる脱アセチル化度を有するキトサン、およびCOSに活性を示すことが明らかにされている。
重合度が3~6のCOSと共にインキュベートした場合、AcCDA1は完全脱アセチル化COSを迅速に生成し、これは既知のCDAの中では比較的珍しい特性である。
AcCDA1によるペンタ-N-アセチルキトペントース((GlcNAc)5)に対する作用機構は、Fusarium graminearumに由来するキトオリゴ糖酸化酵素(FgChitO)を用いてCOSの還元性N-アセチル-D-グルコサミン単位をラベリングする新規な手法を採用した質量分析法によって調査された。
COSを用いたキネティック研究では、(GlcNAc)5に対するkcat/Km値が18.8 mM-1 s-1に達し、高い酵素効率が示された。
AcCDA1はコロイド状キチン中のアセチル基の12%を除去し、一方で様々なキトサンのアセチル化度を劇的に低下させたと報告されている。
他の3種類のCDAとの比較研究では、AcCDA1は非常に効率的な酵素であることが明らかになり、各酵素間の類似点と相違点が同定されている。
これらの知見から、キチン状物質の酵素加工中に様々なCDAが異なる脱アセチル化目標を達成可能であることが示唆される。"
"キチンは高付加価値応用に向けた著しい可能性を有する構造生体高分子であり、キチン脱アセチル化酵素(CDA)がキチンをキトサンおよび部分アセチル化キトオリゴ糖(COS)に変換する可能性を有している。
筆者らはAbsidia coeruleaという糸状菌から分離したキチン脱アセチル化酵素であるAcCDA1の発現と特性化について報告しており、AcCDA1がコロイド状キチン、部分脱アセチル化キチン、異なる脱アセチル化度を有するキトサン、およびCOSに活性を示すことが明らかにされている。
重合度が3~6のCOSと共にインキュベートした場合、AcCDA1は完全脱アセチル化COSを迅速に生成し、これは既知のCDAの中では比較的珍しい特性である。
AcCDA1によるペンタ-N-アセチルキトペントース((GlcNAc)5)に対する作用機構は、Fusarium graminearumに由来するキトオリゴ糖酸化酵素(FgChitO)を用いてCOSの還元性N-アセチル-D-グルコサミン単位をラベリングする新規な手法を採用した質量分析法によって調査された。
COSを用いたキネティック研究では、(GlcNAc)5に対するkcat/Km値が18.8 mM-1 s-1に達し、高い酵素効率が示された。
AcCDA1はコロイド状キチン中のアセチル基の12%を除去し、一方で様々なキトサンのアセチル化度を劇的に低下させたと報告されている。
他の3種類のCDAとの比較研究では、AcCDA1は非常に効率的な酵素であることが明らかになり、各酵素間の類似点と相違点が同定されている。
これらの知見から、キチン状物質の酵素加工中に様々なCDAが異なる脱アセチル化目標を達成可能であることが示唆される。"

